Tinción Gram
La tinción de Gram es un tipo de tinción diferencial empleado en microbiología para la visualizar bacterias, sobre todo en muestras clínicas. Su nombre viene del bacteriólogo danés Christian Gram, que desarrolló la técnica en 1884. Se utiliza tanto para poder referirse a la morfología celular bacteriana como para poder realizar una primera aproximación a la diferenciación bacteriana, considerándose Bacteria Gram positiva a las bacterias que se visualizan de color violeta y Bacteria Gram negativa a las que se visualizan de color rosa.
OBJETIVOS
1. Clasificar algunas especies bacterianas en Gram positivas o Gram negativasde acuerdo a la tinción de Gram.
2. Comprender la importancia que tienen estas tinciones para la caracterización e identificación de las bacterias.
MATERIALES:
- Mechero
- Portaobjetos
- Cristal violeta
- Solución de lugol
- Alcohol (acetona)
- Safranina
- Aceite de inmersión
PROCEDIMIENTO
1. Elaborar preparaciones fijas de las bacterias a observar.
2. Añadir 1 ó 2 gotas de cristal violeta a la preparación, hasta que se cubra por
completo. Dejar actuar el colorante durante 1 minuto.
3. Una vez transcurrido el tiempo, lavar la preparación con la pízeta sobre el recipiente
de plástico para tinciones.
4. Agregar 1 ó 2 gotas de solución lugol a la preparación, y dejar actuar 1 minuto.
Transcurrido el tiempo, lavar.
5. Con cuidado, añadir gota a gota el alcohol-acetona lavando la preparación durante
10 segundos.
6. Añadir el colorante de contraste, safranina (1 o 2 gotas) y dejar actuar durante 30
segundos.
7. Colocar una gota de agua entre el porta y el cubre para hacer un bacio
8. Colocar una gota de aceite encima del cubre para no dañar las lentes.
Vídeos
https://www.youtube.com/watch?v=Rsjka-28RRc
https://www.youtube.com/watch?feature=fvwp&v=9y7uAhoWwFg&NR=1
